夏天的120 发表于 2010-9-23 22:10

艾滋病(HIV)~试剂检测~说明

目前常用的艾滋病检测方法,是快速法和酶标法,快速法一般用的都是金标法检测,酶标也就是我们常说的酶联法检测。

酶联法,又叫“酶联免疫法”,灭活了的抗原与被检者血液的血清混在一起,有颜色变化的,则初检阳。无色或颜色变化微弱的,则为阴。不管有无颜色变化,都要用酶标仪检测。

酶联免疫法,简称ELISA。它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。必须经过确认实验室确认后才可出阳性诊断。注意:第一次检测为阳性的话,一定要去确认实验室再做一次,勇敢的去面对,也许结果就不一样了。

酶标现在分四代:

第一代试剂 1985 ELISA 间接法 培养纯化抗原 51 ~ 55 天

第二代试剂 1990 ELISA 间接法 重组表达抗原 42 ~ 45 天

第三代试剂 1994 ELISA 双抗原夹心法 重组表达抗原 22 天

使用合成多肽HIV抗原(少数用重组抗原),应用双抗原(或双抗体)夹心法原理检测HIV抗体(或抗原)。由于标记HIV抗原可同时检测血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体,此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。

第四代试剂 1998 ELISA 夹心法 检测抗原和抗体 16 天

此类试剂在第三代试剂盒基础上,将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原一起包被固相载体,可同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。

很多艾滋病病友问,现在使用的是几代试剂,现在大多是3代,有用到4代的(二代早就停产了,现在没有二代试剂)。金标不分代,但等同于酶标三代。

副官 发表于 2010-9-23 23:12

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