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发表于 2011-1-5 14:34
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2.5 HIV核酸检测 HIV核酸检测,通常是检测HIV RNA,以前只能定性检测血液中是否存在病毒核酸,而目前的技术可定量检测血液中病毒复制水平。HIV核酸定性检测可用于HIV感染的辅助诊断,如窗口期辅助诊断、病程监控、指导治疗方案及疗效测定、预测疾病进程等。通常使用PCR或RT-PCR技术,使用分子生物学实验室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行设计,应尽量覆盖所有或常见的毒株,也可使用复合引物。HIV核酸定量检测多用于监测HIV感染者的病程进展和抗病毒治疗效果,目前常用的测定方法有逆转录PCR实验(RT-PCR)、核酸序列扩增实验(NASBA)、分支DNA杂交实验(bDNA)等。在不同HIV定量检测方法的选择中,由于目前用于统一不同定量方法检测值的标准品尚未问世,因此不同定量方法结果之间还无法直接进行比较,建议同一病人治疗前后用同一方法进行HIV定量检测。
值得注意的是,HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实验结果阴性,但不能排除HIV感染;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV感染的辅助指标,不能单独用于HIV感染的诊断,报告定性检测结果时还应注明反应条件和所使用的引物序列。报告HIV核酸定量检测结果时应按照仪器读数报告结果,注明使用的试验方法、样品种类和样品量,当测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平,低于最低检测限的结果不能排除HIV感染[6,16]。
文献报道:31份类风湿系列阳性和/或ANA阳性标本中,抗HIV检测不合格为9份,占29.0%。我站34份抗HIV不合格标本中,类风湿系列阳性或ANA阳性为10份,占29.4%。其原因可能为间接法测抗HIV试剂盒中所用的酶标记抗人IgG可与非特异性吸附的IgG或RF、ANA等自身抗体结合,导致假阳性的产生。可见,类风湿系列和抗核抗体对抗HIV间接法检测影响较大[17]。
总之,产生假阳性的原因是多方面的,主要包括:(1)个人身体原因,如一些特殊体质、过敏体质、孕产妇,容易产生非特异反应。我们在日常检测中就遇到过。(2)感染其他疾病,如HBV、HCV、梅毒等,可能会造成一些非特异的交叉反应。(3)试剂原因,因为任何一种试剂都难以达到100%准确。(4)操作原因,如操作中的交叉污染。
对于(1)~(3)项,可以通过流行病学调查和其他辅助诊断方法(如核酸检测)加以排除。对于(4)项,其实是一种操作错误,在检测中应该尽可能杜绝,这就要求检验人员在检测过程要非常仔细小心。
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