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中国人血液淋巴细胞免疫表型参考值调查

中华医学检验杂志 1998年第4期第0卷 论著

作者：朱立华　王建中

单位：100034 北京医科大学第一医院检验科

　　关键词：
淋巴细胞免疫表型；参考值；流式细胞术

　　【摘要】　目的　建立健康中国**血液淋巴细胞免疫表型分析参考值。方法　用Simultest IMK-Lymphocyte试剂盒的荧光抗体对102例健康中国**血液进行染色，以FACSort流式细胞仪进行分析，Simulset程序获取数据并分析结果，SPSS软件进行统计。结果　18～65岁健康中国**淋巴细胞参考值范围CD+3细胞是50%～84%（955～2 860/μl），CD-3CD+19细胞为5%～18%(90～560/μl)，CD+3CD+4细胞为27%～51%(550～1 440/μl)，CD+3CD+8细胞为15%～44%(320～1 250/μl)，CD-3、CD+16和/或CD+56细胞为7%～40%(150～1 100/μl)，CD+3CD+4/CD+3CD+8比值为0.71～2.87。随着年龄增长CD+3CD+4细胞略有升高，CD+3CD+8细胞略有降低。NK细胞在大年龄组女性低于男性，且有统计学差异(P＜0.05)。与高加索人和美国人相比，中国人的CD+3CD+8细胞和NK细胞(CD-3，CD+16和/或CD+56)的相对值(百分率)与绝对值均高，CD-3CD+19细胞和CD+3CD+4细胞仅相对值较低，但绝对值不少。CD+3CD+4/CD+3CD+8比值向低值漂移。结论　种族、性别、年龄和环境因素可影响健康人淋巴细胞表型分布。

　　Reference values on blood lymphocyte immunophenotype in healthy Chinese adult
　Zhu Lihua, Wang Jianzhong, First Hospital, Beijing Medical University, Beijing,
100034

　　【Abstruct】　Objective　To establish the reference values on blood lymphocyte immunophenotype in healthy Chinese adults.Method　Staining whole blood with fluorescein-conjugated monoclonal antibodies supplied by simultest TM IMK lymphocyte kit, we analyzed 102 healthy Chinese residents (age range 18～65 years) by FACSort flow cytometer, acquired results by Simultest programme, and performed statistical analysis by SPSS software.Results　The 95% reference ranges in absolute counts per microliter of whole blood (percentage of lymphocytes) for CD+3, CD+3CD+4, CD+3CD+8, CD-3CD+19, CD-3/CD+16
and/or CD+56
cells were 955 to 2 860 (50% to 84%), 550 to 1 440 (27% to 51%), 320 to 1250 (15% to 44%), 90 to 560 (5% to 18%), 150 to 1 100 (7% to 40%) respectively. The CD+3CD+4/CD+3CD+8
ratio was 0.71 to 2.87. CD+3CD+4
cells increased and CD+3CD+8
cells decreased slightly with age. Women were compared to men in old age group, NK cells (CD-3/CD+16
and/or CD+56) were lower (P＜0.05). Compared with Caucasians and Americans, Chinese had higher percentage and absolute numbers of CD+3CD+8
and NK cells, but had lower percentage of CD-3CD+19
and CD+3CD+4
cells without absolute number change. So CD+3CD+4/CD+3CD+8
ratio skew to the lower values.Conclusion　The race, age and environment could influence the reference value of lymphocyte immunophenotype.

　　【Key words】　Lymphocyte immunophenotype　　Reference value　　Flow cytometry

　　一、研究对象

　　102例标本均取自于无免疫性疾病、无现症、不吸烟、体检健康、血细胞计数及肝、肾功能检查正常的**。年龄18～65岁，其中男性54人，女性48人。首先按男女性别分为两大组，每组中又以40岁为界，≤40岁者为小年龄组（男24人，女19人），＞40岁者为大年龄组（男30人，女29人）。

　　二、 实验方法

　　静脉取血2～3 ml，以15 IU/ml肝素抗凝，立即送检。抗凝血在0.5～1小时内以CA570型血细胞计数仪进行白细胞计数与分类。在6小时内行荧光抗体染色。所用荧光抗体为Simultest IMK-Lymphocyte试剂盒（美国Becton Dickinson产品）。每份标本同时做6管，即IgG1/IgG2a， CD45/CD14，CD3/CD19，CD3/CD4，CD3/CD8，CD3/CD16、CD56。分别加入相应荧光抗体试剂20 μl和100 μl混匀的抗凝血于各试管底部，彻底混合后置室温暗处孵育30分钟，然后加入1×溶血液（FACS溶解液）2 ml迅速于混旋器上混匀，再置室温暗处孵育10分钟后，300×g离心5分钟。吸去上清，留下50 μl的残液，以免沉淀中细胞丢失。于混旋器彻底混匀沉淀物后，加入PBS2 ml洗涤，并以200×g离心沉淀5分钟。吸去上清，混匀细胞后加入0.5 ml 1%多聚甲醛，彻底混匀后置2～8℃冰箱中待检。

　　流式细胞分析一般在染色后24～48小时内进行，采用FACSort流式细胞仪（Becton Dickinson公司产），以Calibrite TM荧光微球校正光电倍增管（PMT）电压，建立荧光补偿，检查仪器灵敏度，使流式细胞仪处于最佳工作状态，然后用Simulset软件按顺序测定6管的光散射及荧光信号并同时分析结果。

　　三、统计学分析

　　全部数据输入电脑，采用SPSS软件包进行统计分析。

表1　102例中国健康**淋巴细胞表型分析统计学参数

项目	均数	标准差	中位数	最小值	最大值
白细胞(个/μl)	7 250	141	7 100	4 400	10 500
淋巴细胞
相对值(%)	34.4	5.42	35.0	20.0	43.0
绝对数(个/μl)	2 479	594	2 484	1 488	4 483
CD+3细胞
相对值(%)	68.0	9.65	68.0	43.0	85.0
绝对数(个/μl)	1 686	490	1 593	948	3 138
CD-3，CD+19细胞
相对值(%)	10.0	3.90	10.0	3.0	21.0
绝对数(个/μl)	261	132	243	63	897
CD+3，CD+4细胞
相对值(%)	38.0	6.73	39.0	23.0	55.0
绝对数(个/μl)	972	341	939	521	2 877
CD+3，CD+8细胞
相对值(%)	28.0	8.30	27.0	13.0	53.0
绝对数(个/μl)	699	282	635	253	1 605
CD-3，CD+16和/或CD+56细胞
相对值(%)	20.0	9.60	19.0	2.0	46.0
绝对数(个/μl)	498	272	410	35	1 433
CD+3，CD+4/CD+3，CD+8	1.51	0.55	1.44	0.43	3.00

表2　中国人淋巴细胞表型参考值

项目	相对值 　　(%)	绝对数 　　(个/μl)
T+B+NK	95～105	1 530～3 700
总T细胞(CD+3)	50～84	955～2 860
总B细胞(CD-3，CD+19)	5～18	90～560
辅助/诱导T细胞(CD+3，CD+4)	27～51	550～1 440
抑制/细胞毒T细胞(CD+3，CD+8)	15～44	320～1 250
NK细胞 　　(CD-3，CD+16和/或CD+56)	7～40	150～1 100
辅助/抑制T细胞比值 　　(CD+3，CD+4/CD+3，CD+8)	0.71～2.78	0.64～2.85

　　　

讨论

表3　不同种族血液淋巴细胞表型分布情况

表型	BD试剂盒	本室	Kam	Websteret	Tollerud	Reichert
相对值(%)
CD+3	59～85	50～84	54.8～83	男46.2～78.9 　　女57.8～82.7	48.3～85.3	61～85
CD+3CD+4	男29～57 　　女31～61	27～51	23.1～51.0	24.1～50.7	29.4～63.3	28～58
CD+3CD+8	11 ～38	15～44	17.9～47.5	男17.1～42.7 　　女19.5～44.6	19.4～38.4	19～48
CD-3CD+16 　　和/或CD+56	5.6～31	7～40	7.1～38	男3.9～38.5 　　女6.4～31.1	仅CD16 　　0.5～24.1	6～29
CD-3CD+19	6.4～23	5～18	5.1～20.8	7.7～25.4	4～19.3	7～23
CD+3CD+4/ 　　CD+3，CD+8比值	0.9～3.6	0.71～2.87	0.6～2.5	0.65～2.49	0.83～3.04	0.6～2.8
绝对数(个/μl)
CD+3	720～2 330	955～2 860	672～2 368		450～2 433	-
CD+3CD+4	男430～1 010 　　女500～1 760	550～1 440	292～1 366	410～1 404	294～1 590	-
CD+3CD+8	170～1 050	320～1 250	240～1 028	-	222～914	-
CD-3/CD+16CD+56	100～430	150～1 100	130～938	-	仅CD16 　　10～507	-
CD-3CD+19	100～430	90～560	82～560	-	58～456	-

参考文献

红丝带飘舞

你这个只是针对淋巴细胞免疫的统计，和艾滋病无关！